Быстрое и точное определение концентраций моноклональных антител (mAb)

Мировая биофармацевтическая отрасль переживает период быстрого роста, при этом самый быстро растущий класс биотерапевтических средств — моноклональные антитела (mAb). На мировом рынке представлено более 30 mAb; некоторые из них приобрели значительную важность в последние годы. В результате такого возросшего внимания было образовано Европейское сообщество по работе с моноклональными антителами (EuroMAbNet). Его задача — объединение ведущих европейских ученых, работающих над производством и применением mAb

В Италии EuroMAbNet представляет лаборатория иммуногенетики университета Турина. Более 30 лет лаборатория занимается селекцией и производством mAb в содружестве с центром исследовательской и экспериментальной медицины (ceRMS). В лаборатории под управлением д-ра А. Л. Хоренштейна (A. L Horenstein) недавно проведена модернизация: переход на колонки Agilent Bio-Monolith с белком А для определения концентраций моноклональных антител.

Особое внимание к моноклональным антителам

Моноклональные антитела — сложные биологические материалы, разработанные для связывания с целевым веществом с высокой специфичностью. Любые изменения в первичной структуре могут негативно повлиять на эффективность или иммуногенность, или на то и другое сразу. По этой причине необходима полная характеристика mAb, которая является сложным процессом, требующим много времени и использования множества методик. Новые технологии, постоянно разрабатываемые для обеспечения точности, высокого пробопотока и надежности анализов, должны соответствовать нормативным требованиям по определению концентраций моноклональных антител.

Поскольку белковые фармацевтические биопрепараты неоднородны, для их полной характеристики необходимо несколько хроматографических методик. Эти методики включают эксклюзионную хроматографию (SEC) для количественного анализа димеров и агрегатов и ионообменную хроматографию (IEX) для идентификации различающихся зарядовым состоянием форм. Обращенно-фазовая ВЭЖХ и хроматография гидрофильных взаимодействий (HILIC) также являются основными методиками биохроматографии. В погоне за выводом на рынок новых лекарственных средств наличие быстрых и точных методик характеристики mAb — первоочередная задача.

Определение концентраций моноклональных антител

Лаборатория иммуногенетики занимается производством и очисткой моно- и биспецифических mAb. Белок А часто используется при очистке и анализе mAb на стадии связывания, обеспечивая высокий пробопоток. Однако использование большого количества белка А слишком затратно. По этой причине для очистки, качественного и количественного анализа моно- и биспецифических mAb, которые модулируют активность различных продуктов метаболизма NAD+, лаборатория использовала колонки Bio-Monolith с белком A и жидкостную хроматографию на гидроксиапатите.

Колонки для ВЭЖХ Bio-Monolith обеспечивают быстрое и точное определение титра mAb в широком диапазоне концентраций. Разработанные для улучшения контроля качества биомолекул и мониторинга процесса производства, колонки содержат сравнительно тонкие монолитные диски на полимерной основе, которые обеспечивают разделение независимо от скорости потока.

Максимальная производительность при использовании колонок Bio-Monolith с белком A

Использование колонок для ВЭЖХ Bio-Monolith с белком А дает неоспоримые преимущества при определении концентраций моноклональных антител, включая высокое разрешение и быстрое разделение, а также аффинное связывание IgG. Д-р А. Л. Хоренштейн (A. L Horenstein) объясняет: «У нас была простая задача — получить нужную информацию за короткий период. Благодаря преимуществам колонок Bio-Monolith, мы смогли их использовать в экспериментах по эффективному определению концентрации mAb.»

Узнать подробнее об университете Турина и о том, как там используют колонки Bio-Monolith с белком А, а также ознакомиться с перечнем возможных решений Agilent для фильтрации проб (http://www.agilent.com/chem/AdvanceBio).

Поделиться