Как максимально использовать возможности ваших систем ВЭЖХ, благодаря новейшей технологии колонок?

LC column technology

Перед лицом усиливающейся необходимости в сокращении времени и затрат на проведение анализов лекарственных продуктов лаборатории постоянно находятся в поиске простых способов повышения производительности. Им необходимо максимально использовать возможности существующего оборудования и ограниченные ресурсы.
Для задач, использующих жидкостную хроматографию (ВЭЖХ), исследователям нужны такие решения, которые позволят увеличить срок службы колонок, время безотказной работы прибора и пробопоток без ущерба для качества данных. Использование новейшей технологии колонок для ВЭЖХ позволяет повысить эффективность любой системы ВЭЖХ и ВЭЖХ-МС.

Обычные трудности при работе с ВЭЖХ

Когда нужно максимально использовать возможности имеющихся приборов, давление и объем имеют большое значение. Основные показатели, определяющие совместимость прибора и колонок для ВЭЖХ, — давление и объем задержки/дисперсии, поскольку использование более коротких колонок и более крупных частиц наполнителя способствует снижению давления. Во многих лабораториях используются стандартные приборы для ВЭЖХ, работающие при более низком давлении, чем приборы для УВЭЖХ. При этом есть необходимость достичь результатов, аналогичных получаемым при работе с более высоким давлением.

Увеличить разрешение возможно за счет улучшения удерживания, изменения селективности или повышения эффективности. На удерживание и селективность влияют химические свойства используемых фаз (или подвижной, или неподвижной фазы). Применение более коротких колонок с повышенной эффективностью позволит ускорить анализ, сохраняя достаточное разрешение.

Колонки часто выходят из строя, и их замена может требовать больших затрат. На стабильность работы колонок негативно влияют различные факторы. Это может быть засорение или загрязнение колонки, растворение частиц наполнителя или унос привитой фазы. В предотвращении таких ситуаций могут помочь пористые вкладыши (фритты), доступные в широком диапазоне размеров пор, предколонки, надежная технология заполнения колонки наполнителем и привитых фаз, а также высокая устойчивость частиц наполнителя.

Преимущества использования поверхностно-пористых частиц для ВЭЖХ

“Потребность в повышении эффективности анализа методом ВЭЖХ послужила предпосылкой для разработки новейшей технологии колонок для ВЭЖХ. Преимущества этой технологии включают увеличение пробопотока, снижение времени разработки методик и сокращение затрат благодаря более длительному сроку службы колонки. Но тем операторам хроматографов, которые не имеют возможности перейти к разделению при более высоких давлениях с помощью УВЭЖХ или встречают при этом затруднения, подобные преимущества могут казаться недоступными.

Колонки для ВЭЖХ с поверхностно-пористыми частицами позволяют существенно повысить эффективность по сравнению с колонками, заполненными традиционно используемыми полностью пористыми частицами, независимо от конфигурации прибора и предпочтительности использования максимального давления. На протяжении многих лет стандартом технологии колонок для ВЭЖХ были частицы наполнителя размером 5 мкм. Многие исследователи были готовы жертвовать эффективностью и пробопотоком, чтобы избежать высоких давлений, работы с незнакомым оборудованием и возможности засорения колонок.

Компания Agilent расширила семейство колонок Poroshell 120 и включила в него колонки с частицами наполнителя размером 2,7 мкм и 4 мкм, что позволило исследователям выбирать наиболее подходящий вариант для своих задач. Использование колонок Poroshell 120 с частицами размером 4 мкм способно улучшить разделительную способность по сравнению с методиками, в которых применяются колонки аналогичных размеров с частицами наполнителя размером 5 мкм. При переходе от колонок с частицами размером 5 мкм на колонки Poroshell 120 c размером частиц наполнителя 4 мкм давление в системе увеличивается незначительно, что исключает необходимость замены прибора. Кроме того, для исключения засорения колонки используются такие же пористые вкладыши с размерами пор 2 мкм, что и для колонок с частицами размером 5 мкм, и при этом не требуется дополнительная пробоподготовка.

В отличие от колонок с частицами размером 2,7 мкм, колонки с частицами размером 4 мкм подходят для использования при более низком давлении. Таким образом, пользователи могут улучшить рабочие характеристики своих систем ВЭЖХ при минимальном увеличении обратного давления и без необходимости значительного изменения методики. Смотрите видеоролик, демонстрирующий простоту переноса методик на колонки Poroshell 120. Колонки Poroshell 120 с частицами размером 2,7 мкм используют при средних рабочих давлениях (до 600 бар). В свою очередь, колонки с частицами размером 4 мкм применяются при более низком давлении (обычно ниже 200 бар), что не мешает им обеспечивать быстрое выполнение анализа с высоким разрешением.

Поверхностно-пористые частицы для ВЭЖХ

В одном исследовании был выполнен перенос градиентной методики с колонки размером 4,6×100 мм с частицами наполнителя размером 5 мкм на колонку Poroshell 120 с частицами размером 4 мкм. Результаты показали, что колонка Agilent Poroshell 120 EC-C18 с частицами размером 4 мкм по сравнению с колонкой с полностью пористыми частицами размером 5 мкм позволяет существенно увеличить эффективность и пиковую емкость, причем она может быть использована с любой системой ВЭЖХ.

Колонки Poroshell 120 с частицами размером 4 мкм — это простой способ повышения рабочих характеристик систем ВЭЖХ. Они обеспечивают высочайшие показатели скорости, разрешения и эффективности работы при использовании с традиционными приборами для ВЭЖХ, а также демонстрируют замечательные рабочие характеристики на приборах для УВЭЖХ. Рабочее давление и ширина пиков, получаемые при работе с колонками с частицами размером 4 мкм, позволяют использовать такие колонки с любыми доступными приборами для ВЭЖХ и получить все преимущества новейшей технологии колонок для ВЭЖХ.

Чтобы узнать, как улучшить пробопоток, сократить время разработки методик и снизить расходы независимо от конфигурации прибора и предпочтительности использования максимального давления, смотрите вебинар (по запросу) «Can I Really Enjoy the Benefits of the Latest LC Column Technology?» (Как можно воспользоваться преимуществами новейшей технологии колонок для ВЭЖХ)

Поделиться