Обработка проб стала еще быстрее

Наличие липидов в пробе может сильно повлиять на результаты анализа ВЭЖХ-МС-МС, создавая множество трудностей в работе лаборатории. Две основные проблемы, к которым приводит наличие в пробе липидов, это несоответствие критериям обнаружения и низкая воспроизводимость.

Наличие липидов может растянуть время, необходимое для разработки методики, увеличить разброс данных и снизить точность анализа. И это не считая времени, необходимого для решения этих проблем. Задача становится еще сложнее, если ваши аналиты элюируются совместно с липидами.

Липиды также могут влиять на чистоту масс-спектрометра и загрязнять детектор после их выхода из колонки. Это приводит к более частой очистке источника ионизации и очистке или замене капилляра. Для очистки прибор надо выключить, что приводит к простоям продолжительностью от 4 часов до целого рабочего дня.

Отложение липидов на колонке для ВЭЖХ влияет на долговечность колонки и может привести к увеличению падения давления на колонке. Чтобы очистить колонку от таких отложений, ее надо промыть органическим растворителем и заново уравновесить, что приводит к простою продолжительностью более 2 часов.

Поэтому, чтобы избавиться от помех вызванных липидами, их следует тщательно удалять на этапе пробоподготовки. Однако очистка от липидов часто является самым сложным и продолжительным этапом пробоподготовки, который занимает больше времени, чем любой другой этап.

При разработке методики пробоподготовки перед лабораторией стоят четыре основные цели:
– Обеспечить как можно более полное удаление мешающих соединений
– Обеспечить высокую степень извлечения аналита
– Эффективно вписать методику в существующий рабочий процесс
– Сделать методику простой для лаборантов и не требующей продолжительной разработки

Отличное решение этих проблем — технология

Captiva EMR–Lipid от компании Agilent, которая помогает эффективно очистить пробу от липидов, не приводит к потере аналита и улучшает качество результатов. Технология Captiva упрощает обработку проб, осаждая белки непосредственно в патроне. Простой график демонстрирует эту процедуру.

Технология позволяет лучше очистить пробу от мешающих соединений, что приводит к улучшению разделения и снижению пределов обнаружения. Инновационный адсорбент в патронах и планшетах Captiva EMR–Lipid поглощает липиды, приводящие к подавлению сигнала ионов, при этом пропуская объемные частицы целевого аналита, как показано на следующем рисунке. Вебинар компании Agilent подробно объясняет технологию и описывает методику очистки. Вы можете посмотреть его по здесь. 

Кому нужны патроны Captiva EMR–Lipid?

Любой исследовательской лаборатории, работающей с образцами сыворотки и плазмы крови человека и животных, патроны Captiva EMR–Lipid дают возможность упростить и ускорить работу. В число таких лабораторий входят клинические и ветеринарные исследовательские организации, а также судебно-медицинские лаборатории.

Эффект от удаления липидов

Липиды в биологических образцах отрицательно влияют на определение метаболитов 25-гидроксипроизводных витаминов D2 и D3. При этом очистка от липидов с помощью ТФЭ занимает значительное время, требует нескольких этапов и разработки новой методики, а обычные методики пробоподготовки, такие, как осаждение белков, не устраняют помехи от липидов. Методика очистки с помощью Agilent Captiva EMR–Lipid позволяет при пропускании пробы через патрон одновременно осадить белки и очистить ее от липидов.

Осажденные белки отфильтровываются при пропускании элюента через адсорбент EMR–Lipid. В отличие от других доступных на рынке решений для удаления липидов, патроны Captiva EMR–Lipid почти не забиваются. Липиды удаляются при совместном действии механизмов гель-фильтрации и гидрофобных взаимодействий, что позволяет получить очищенный элюент, готовый для анализа.

Использование методики Captiva EMR–Lipid позволило значительно улучшить воспроизводимость. Относительное стандартное отклонение (ОСО) снизилось с более чем 25% до всего лишь 3% в сравнении с той же пробой, очищенной только по методике осаждения белков.

Рекомендации по применению компании Agilent описывают весь процесс обработки пробы и проведения эксперимента, который позволил достичь непревзойденной степени очистки, а также точности и воспроизводимости результатов анализа. Методика является простой и быстрой, но при этом позволяет глубоко очистить пробу от матрицы, что обеспечивает максимальную аналитическую чувствительность, минимальный эффект памяти и высокую воспроизводимость.

Получение качественных данных

Эти проблемы — только часть из тех, с которыми сталкиваются лаборанты, работающие с пробами, загрязненными липидами. Попробуйте Captiva EMR–Lipid от компании Agilent и вы увидите, насколько улучшились результаты ваших анализов.

Только для исследовательских целей. Не для использования в диагностических процедурах

Поделиться